توجد في الخلية أنواع من الأنزيمات تقوم بقطع DNA عند مناطق محددة.
وتعرف هذه الأنزيمات باسم تقييد الأحماض النووية الداخلية.
وتتميز مناطق القطع باحتوائها على عدد محدد من القواعد النيتروجينية.
ويمكن لهذه الأنزيمات قطع فتيلتي DNA عند مناطق غير متناظرة مما يؤدي إلى أطراف أحادية الفتيل، ويسهل التصاق هذه الأطراف بأطراف أخرى متممة.
يتم في هذه الحالة قطع الحمض النووي من الخلايا المتبرعة والبلازميد بنفس أنزيم التقييد لأجل استحداث أطراف ذات نهايات متممة بين DNA والبلازميد.
وعند إضافة الأجزاء المقطوعة من DNA إلى أجزاء البلازميد ليصبح بلازميد جديد يحمل جزء من DNA المقطوع يمكن إدخاله في الخلية البكتيرية ليتكاثر بداخلها.
وقد تم اكتشاف أنزيمات أخرى تعرف باسم أنزيمات الربط تقوم بإغلاق الفراغ الذي أحدثه أنزيم التقييد، بهذه الصورة يستعيد البلازميد شكله الحلقي.